Aberto ao público desde 1994, o Museu da Santa Casa da Misericórdia de Matosinhos acolhe um riquíssimo acervo, constituído por legados de benfeitores e por aquisições próprias da Instituição. Da valiosa coleção fazem parte numerosos retratos e um núcleo de Arte Sacra em que se destacam as faustosas paramentarias e alfaias litúrgicas, algumas pinturas a óleo com cenas da Paixão de Cristo, diversos objetos em talha dourada e a interessante coleção de ex-votos, oferecidos pelos devotos do Senhor de Matosinhos, datados sobretudo do século XIX. É possível visitar o espaço mediante marcação prévia, com entrada gratuita.